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10R-現貨
質體大量萃取套組(滴管)-10R
產品編號
:
Bio-PM10
產品規格
:
10 R
廠 牌
:
Biokit
詳細資料
一、 產品基本資料
產品名稱:Plasmid Maxiprep Kit, 10R
產品編號:Bio-PM10
產品規格:10 R
廠牌:Biokit
技術原理:鹼溶裂法結合陰離子交換層析技術 (Alkaline Lysis & Anion-Exchange Chromatography)
樣品大小:250 - 500 ml 細菌液體培養
質體產量:300 - 500 µg (最大可達 500 µg)
核酸結合力:每個大量純化管柱之最大核酸結合量多至 500 µg DNA
高純度指標:吸光度比值穩定維持於 1.8 - 2.0 (OD260/280)
操作時間:約 120 分鐘即可完成全流程
產品特點:
低污染高純度:搭配核醣核酸分解脢處理,可減少基因體及核醣核酸的污染。
安全無毒:全套組試劑製程無有機化學藥品及危險化學藥品。
儲存條件:室溫(15-25°C)乾燥保存
二、 化學性質
專一性陰離子交換介質:層析管柱基質表面修飾具高密度正電荷的功能基團,在特定流體力學環境下,能與帶負電荷的質體 DNA 骨架產生極高親和力的靜電結合。
雙重去污染裂解系統:利用鹼溶裂法迅速變性染色體 DNA 與蛋白質,同時藉由高活性核醣核酸分解脢在特定 pH 緩衝液下完整降解宿主 RNA。
高鹽選擇性洗脫化學:洗脫緩衝液具備高濃度反離子(高鹽緩衝液),能競爭性置換與層析基質結合的質體 DNA,將其高效率純化出來。
中性重懸與洗滌體系:清洗緩衝液能有選擇性地移除未結合的蛋白質、細胞代謝物與微量脂質,不干擾管柱內已結合的核酸結構。
三、 核心實驗應用情境
大量質體富集與轉殖:專為 250-500 ml 細菌培養液設計,可在 120 分鐘內快速產出高達 500 µg 的高品質質體,滿足大規模轉殖與克隆需求。
高規格核酸定序與放大反應:優異的吸光度比值(1.8-2.0)展現極高純度,不含任何有機化學藥品,可完美應用於常規與次世代核酸定序,以及高靈敏度的核酸放大反應。
限制酶片段多型性 (RFLP) 分析:完全移除內源性核酸酶與細胞雜質,純化出的質體能被限制酶精確且完全地切割,確保 RFLP 圖譜的清晰與高重複性。
四、 實驗操作注意事項
菌體用量與裂解配比:請勿超過 500 ml 的細菌培養量。菌體量過大會造成鹼溶裂解不完全或黏稠度過高,導致基因體 DNA 污染,進而降低質體純度。
重力流速與管柱平衡:離子交換管柱在加樣前務必依說明書進行平衡。純化過程中需確保液體依重力自然流下,切勿強行加壓,以維持最佳的核酸結合與清洗效果。
酒精沉澱與洗滌要領:使用高鹽緩衝液洗脫後,需以異丙醇或乙醇進行酒精沉澱。沉澱後的 DNA 團塊務必以 70-75% 酒精小心清洗並完全風乾,確保無殘留鹽類與酒精干擾下游實驗。
質體重懸與完全溶解:沉澱風乾完畢後,請加入適量無核酸酶水或中性緩衝液,於室溫或 4°C 靜置使其完全溶解,避免因溶解不均影響定量與後續限制酶切割效率。
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Plasmid Maxiprep Kit-滴管-p-maxi.pdf
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2011/10/27 上午 11:33:01
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