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Ponceaus S Stain Solution |
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| Ponceaus S Stain Solution |
產品編號 : BB-35
產品規格 : 250 mL
廠 牌 : Biokit |
| 詳細資料 |
一、 產品基本資料
- 中文名稱: 麗春紅 S 染色液
- 英文名稱: Ponceau S Staining Solution
- 產品外觀: 紅色至深紅色澄清液體
- 產品型式: 1× 即用型工作液 (Ready-to-use)
- 產品包裝: 250 mL
- 儲存條件: 2–8°C 避光保存,切勿冷凍
- 產品效期: 未開封自製造日起 12 個月,開封後建議於 6 個月內使用完畢
二、 化學性質與終濃度成分
- 0.1% (w/v) Ponceau S (CAS No. 6226-79-5)
- 5% (v/v) 冰乙酸 (Glacial Acetic Acid, CAS No. 64-19-7)
- 餘量: 去離子水 (ddH₂O)
- 作用原理: 在 5% 冰乙酸構成的酸性環境下,帶負電電荷的 Ponceau S 染料與蛋白質上帶正電的氨基酸殘基發生相互作用,實現快速非特異性靜電結合。
三、 核心實驗應用情境
- Western Blot 轉膜效率評估: 蛋白質轉移至固相膜(PVDF 膜或 NC 膜)後,用於快速目視確認蛋白質轉移效率、條帶完整性、排除氣泡干擾或條帶歪斜等轉膜異常。
- 總蛋白質上樣量均一性確認 (Loading Control): 在進行免疫雜交反應前,定性評估各個電泳泳道(Lane)間的總蛋白質總量是否一致。
- 分子量標準定位: 用於精確標記蛋白質分子量標準(Protein Marker)的位置,便於後續裁剪膜或進行條帶比對。
四、 核心操作步驟
- 膜孵育: 將轉膜後的 PVDF 或 NC 膜浸入適量麗春紅染色液中(須完全覆蓋膜面),於室溫水平搖床上輕柔晃動 3–5 分鐘。
- 背景漂洗: 倒出並回收染液。加入適量去離子水(ddH₂O),在搖床上短暫漂洗 1–2 分鐘,至背景轉為白色、紅色蛋白質條帶清晰呈現。
- 完全去色: 拍照記錄後,使用 TBST 或 PBS 緩衝液大量漂洗 2–3 次(每次 5 分鐘),或直接投入弱鹼性的 Blocking Buffer(封閉液)中,紅色條帶即可完全褪去,不影響後續抗體雜交與 ECL 發光偵測。
五、 關鍵注意事項
- 固相膜材質禁忌: 本產品絕對不可用於尼龍膜(Nylon membrane)。尼龍膜本身帶有強烈正電荷,會與麗春紅染料產生永久性結合,導致全膜深紅且無法洗退。
- 重複使用限制: 本染色液可回收重複使用 2–3 次。但隨著使用次數增加,轉膜緩衝液的帶入會改變 pH 值並降低染料濃度,若發現顯色變淡或背景上升請即時更換新液。
- 快速去色技巧: 若高濃度蛋白質著色過深、使用常規緩衝液去色緩慢時,可將膜浸入 0.1 M NaOH 溶液中輕搖 1 分鐘進行強制去色,隨後立即用去離子水洗淨。
六、 安全與用途聲明
- 安全防護: 本產品含有 5% 冰乙酸,具輕微刺激性氣味。操作時請配戴標準實驗室防護裝備,包括實驗衣、乳膠或丁腈手套及護目鏡。
- 用途限制: 本產品僅限科學研究與研發使用(For Research Use Only, RUO)。不得用於臨床診斷、醫療行為、食品、化妝品、藥物或家庭用途。
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