📦 酵母菌基礎氮源培養基（Yeast Nitrogen Base / YNB）規格說明書

🔬 一、 標準生化特性
Yeast Nitrogen Base（簡稱 YNB）是微生物學與真菌遺傳學中，用於培養、鑑定及篩選酵母菌（如 Saccharomyces cerevisiae 與 Pichia pastoris）最標準化的化學合成最低限度培養基（Chemically Defined Minimal Medium Base）。

• 化學成分完全明確： 與含有複合天然成分（如酵母萃取物、蛋白腖）的 YPD 培養基不同，YNB 的每一種無機鹽、維生素、胺基酸與微量元素的確切分子結構與濃度皆是完全已知且固定的。
• 不含碳源（碳源空白）： 預設不含葡萄糖或其他任何碳水化合物。這提供了一塊完全空白的碳代謝畫布，可由實驗人員依研究需求自由添加。
• 高效無機氮源： 以高濃度的**硫酸銨（Ammonium Sulfate）**作為核心，提供酵母菌合成自身蛋白質與核酸的基本氮源。

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⚖️ 二、 兩大核心衍生規格對比（產品選型指南）
在市場採購或文獻設計中，YNB 主要依據**「是否含有胺基酸」**區分為兩大規格，其技術指標與應用場景有決定性差異：

比較項目	1. 含有完整胺基酸（YNB with Amino Acids）	2. 不含胺基酸（YNB without Amino Acids）
市售英文品名	Yeast Nitrogen Base	Yeast Nitrogen Base, without Amino Acids
標準 1X 秤重	11.7 g / L（含硫酸銨、維生素、微量元素及胺基酸混合物）	6.7 g / L（僅含硫酸銨、維生素、微量元素）
預設胺基酸組分	內含組胺酸、甲硫胺酸、色胺酸等完整必需胺基酸。	完全不含任何胺基酸。
核心應用情境	1) 野生型或非缺陷型酵母菌的常規最低限度培養。 2) 微生物碳源同化代謝鑑定試驗（Assimilation Tests）。	1) 基因轉殖酵母菌的營養缺陷型（Auxotrophic）陽性選殖篩選。 2) 自配特定胺基酸缺乏培養基（如 SD-Ura, SD-Leu）。
與缺陷補充劑 (Drop-out) 搭配	不適用（因其本身已自帶胺基酸，會破壞篩選背景）。	必須搭配。外加 Drop-out 混合粉末以精確控制特定胺基酸的缺失。

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🧬 三、 1X YNB 基礎無機與微量元素組成（每公升 / 1000 mL 基底）
無論哪種規格，其核心的基礎無機鹽與維生素體系皆相同（每公升工作液含 6.7g 基礎成分）：

• 唯一氮源： 硫酸銨（Ammonium Sulfate）5.0 g
• 主要無機鹽： 磷酸二氫鉀 1.0 g、硫酸鎂 0.5 g、氯化鈣 0.1 g、氯化鈉 0.1 g
• 微量元素群（Trace Elements）： 硼酸 0.5 mg、硫酸錳 0.4 mg、硫酸鋅 0.4 mg、氯化鐵 0.2 mg、鉬酸鈉 0.2 mg、碘化鉀 0.1 mg、硫酸銅 0.04 mg
• 核心維生素群（Vitamins）： 肌醇 2.0 mg、泛酸鈣 0.4 mg、菸鹼酸 0.4 mg、鹽酸吡哆醇（B6）0.4 mg、鹽酸硫胺（B1）0.4 mg、對胺基苯甲酸（PABA）0.2 mg、核黃素（B2）0.2 mg、生物素 0.002 mg、葉酸 0.002 mg
• 最終 1X 溶液預設 pH 值（25°C）： 5.4 ± 0.2

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🧪 四、 標準實驗室製備與除菌操作規範（Directions）

1. 配製 10X 高濃度儲備液（Stock Solution — 推薦做法）：
   • 由於 YNB 內含大量極度熱敏感的維生素 B 群與微量元素，絕對不可直接放進滅菌釜高壓滅菌（Do not autoclave!），否則高溫會導致培養基營養全面降解失效。
   • 操作： 秤取 117.0 公克（含胺基酸規格）或 67.0 公克（不含胺基酸規格）的 YNB 脫水粉末，完全溶解於 1000 毫升的蒸餾水中。若有需要，可在此步驟一併加入所需的碳源（如 20g 葡萄糖）或胺基酸缺陷補充粉。
2. 無菌過濾除菌：
   • 使用 0.22 μm 微孔濾膜進行無菌過濾（Filter Sterilization），將除菌後的 10X 儲備液置於 4°C 冰箱中避光保存。
3. 無菌混合成 1X 工作液：
   • 液態肉湯（Broth）： 取 100 mL 的無菌 10X YNB 儲備液，無菌加入 900 mL 的無菌蒸餾水中混勻。
   • 固態瓊脂（Agar 平板）： 將 15.0 公克洋菜粉先加入 900 毫升水中，獨立進行 121°C、15 分鐘高壓滅菌。待滅菌完的洋菜水膠體降溫至約 50°C（手摸溫熱不燙手）時，在無菌操作台內，將 100 mL 的 10X YNB 儲備液無菌倒入其中，充分搖勻後立即倒板。