TB Dry Broth 產品編號 ： CH26.500 產品規格 ： 500g 廠       牌 ： Chumeia 詳細資料 📦 TB 脫水液態培養基（Terrific Broth Dry Broth / TB Dry Broth）規格說明書 🔬 一、 標準配方比例（每公升 / 1000 mL） TB（Terrific Broth）是由 Tartof 和 Hobbs 於 1987 年研發的高密度（Rich Medium）液態培養基。市售標準脫水粉末（如 Sigma-Aldrich T9179 或 Merck GranuCult® TB Broth）每公升的標準基礎秤重通常為 47.6 公克： 胰蛋白腖（Tryptone）： 12.0 g（提供極豐富的小分子胜肽與有機氮源） 酵母萃取物（Yeast Extract）： 24.0 g（高濃度設計，常規 LB 培養基的近 5 倍，供應大量的維生素 B 群與生長因子） 磷酸氫二鉀（K₂HPO₄）： 9.4 g（主緩衝對，提供高強度的 pH 穩定效果） 磷酸二氫鉀（KH₂PO₄）： 2.2 g（次緩衝對，協同維持發酵環境的中性） 最終 pH 值（25°C）： 7.2 ± 0.2 ⚠️ 專利/標準備註：市售 TB Dry Broth 通常不包含核心碳源——甘油（Glycerol），必須在配製時由實驗人員額外外加。 🧫 二、 微生物培養的核心應用情境 TB Dry Broth 是分子生物學與生物技術製程中，專門用於基因重組大腸桿菌（E. coli）「超高密度發酵」與「重組蛋白/質體高產量表現」的金本位高階肉湯： 突破常規 LB 的菌體密度極限： 傳統 LB 肉湯在細菌生長至對數後期時，常因營養耗盡與環境酸化而停止分裂。TB 透過近 5 倍的酵母萃取物營養，能支持大腸桿菌達到極高細胞密度（High Cell Density）。 重組蛋白產量極大化： 提供高密度的即時氮源，能在大腸桿菌接受 IPTG 誘導表現（Induction）後，支持其體內繁重的蛋白質轉錄與轉譯工作，大幅提升重組蛋白的最終收穫量。 高拷貝質體複製（Plasmid Production）： 在進行大規模質體抽取（如 Maxiprep / Megaprep）前，使用 TB 培養大腸桿菌，可在相同的培養體積下，複製出遠高於 LB 培養基數倍以上的質體 DNA 總量。 🛠️ 三、 核心必備添加物：甘油（Glycerol）的緩釋作用 標準的 TB 培養基在加熱溶解前，必須外加甘油作為核心碳源與能量來源： 添加規格： 每 1000 mL 的 1X 培養基中，必須加入 4 mL（或 5.0 g）的甘油。 生化機制（為什麼不用葡萄糖？）： 如果使用葡萄糖，大腸桿菌快速代謝後會產生大量副產物「醋酸（Acetate）」，導致培養基劇烈酸化並抑制細菌生長。 甘油（Glycerol）屬於慢速緩釋型碳源。 大腸桿菌代謝甘油的速度較平緩，不易產生醋酸，再配合配方中強效的磷酸鹽緩衝系統（K₂HPO₄ / KH₂PO₄），能讓菌液在長時間、高密度發酵下，pH 值依然穩定維持在中性範圍（7.2 左右），進而延長細菌的對數生長壽命。 🧪 四、 標準實驗室製備與滅菌操作規範（Directions） 懸浮與混合： 秤取 47.6 公克 的預混 TB 基礎脫水粉末，懸浮於約 900 毫升的蒸餾水或去離子水中。 加入碳源（關鍵）： 加入 4.0 毫升的甘油（Glycerol），隨後加入蒸餾水定容至 1000 毫升。 溶解： 使用磁力攪拌器徹底攪拌均勻。由於粉末中含有極高濃度的酵母萃取物（24g/L），若有微量未溶顆粒，可稍微微溫加熱以輔助完全澄清，不需如同洋菜般煮沸。 高壓滅菌： 分裝至大容量錐形瓶中（建議液體體積不要超過瓶身容量的 20%，以利震盪時的空氣溶氧）。使用滅菌釜以 15 磅壓力（121°C）精準維持 15 分鐘。 抗生素添加時機： 滅菌完成後置於室溫。若需加入熱敏感抗生素（如 Ampicillin、Kanamycin），必須等待肉湯**徹底降溫至 50°C 以下（或室溫）**後方可加入，避免高溫導致抗生素失效。 請問您這次配製 TB 液態培養基，主要是要用於大規模抽取重組質體（Plasmid Maxiprep），還是要進行 IPTG 誘導重組蛋白質的表現呢？我可以根據您的具體目的，提供最適合的震盪培養轉速（RPM）與誘導時間點建議。

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