|
|
|
|
|
| |
|
|
| SOB Broth Agar |
產品編號 ： SD7008
產品規格 ： 250 g
廠 牌 ： CHUMEIA |
| 詳細資料 |
📦 SOB 瓊脂培養基（SOB Broth Agar / SOB Agar）規格說明書
🔬 一、 標準配方比例（每公升 / 1000 mL）
SOB 瓊脂培養基是在經典 SOB 液態肉湯 的基礎上，額外添加固化劑（洋菜粉）所製成的固體固態培養基。其市售標準脫水粉末（或自配）每公升的標準秤重通常為 41.0–43.0 公克：
- 胰蛋白腖（Tryptone）： 20.0 g（高濃度短鏈胜肽，提供核心有機氮源）
- 酵母萃取物（Yeast Extract）： 5.0 g（提供維生素 B 群與微量元素）
- 氯化鈉（NaCl）： 0.5 g（極低鹽/低鈉設計，僅為常規 LB 培養基的 5%）
- 氯化鉀（KCl）： 0.186 g（輔助調整細胞膜電位平衡）
- 洋菜粉（Agar）： 15.0 g（高級固化瓊脂，無營養價值）
- 最終 pH 值（25°C）： 7.0 ± 0.2
🧫 二、 微生物培養的核心應用情境
SOB Agar 是分子生物學與遺傳工程中，專門用於高效率轉型（Transformation）後「基因重組大腸桿菌（E. coli）」固體篩選與菌落挑取的明星瓊脂平板：
- 提升敏感突變株與脆弱細胞的存活率： 其「極低鈉、高有機氮」的環境能將環境滲透壓對細胞膜的衝擊降到最低。非常適合用於塗布熱休克（Heat Shock）或電穿孔（Electroporation）後、處於極度脆弱狀態的勝任細胞（Competent Cells）。
- 菌落發育粗壯發達： 由於 Tryptone 營養濃度比常規 LB 提高了一倍，大腸桿菌在其表面形成的單一菌落（Single Colony）體積通常更大、更為健壯，能顯著縮短在 37°C 溫箱中的培養等待時間。
🛠️ 三、 核心必備添加物：二價金屬離子的黃金比例
與液態 SOB 相同，為了維持大腸桿菌外膜的穩定性，SOB Agar 在滅菌完成、準備倒平板前，必須在無菌操作台內額外補充高濃度的鎂離子（Mg²⁺）：
- 2 M 鎂離子儲備液（Magnesium Stock Solution）配製：
- 將 1 M 硫酸鎂 (MgSO₄·7H₂O) 與 1 M 氯化鎂 (MgCl₂·6H₂O) 依 1:1 體積混合後過濾除菌（Filter Sterilized）。
- 工作液添加量：
- 在每 1000 mL 滅菌後且降溫至約 50°C 的 SOB 瓊脂中，必須無菌加入 10 mL 的 2 M 鎂離子儲備液（使其最終濃度達到 20 mM）。
- 生化功能： 高濃度的鎂離子在固體表面依舊扮演著穩定受損細菌外膜的關鍵輔因子。
🧪 四、 標準實驗室製備與倒板操作規範（Directions）
- 懸浮溶解： 秤取預混之 SOB 瓊脂粉末（或依 Tryptone 20g, Yeast 5g, NaCl 0.5g, KCl 0.186g, Agar 15g 比例自行調配），完全懸浮於 1000 毫升的蒸餾水或去離子水中。
- 加熱煮沸： 使用磁力加熱攪拌器邊攪拌邊加熱至沸騰維持 1 分鐘，確保洋菜粉完全膠化、不溶顆粒徹底溶解。
- 高壓滅菌： 使用滅菌釜以 15 磅壓力（121°C）精準維持 15 分鐘。
- 添加二價鹽與抗生素（關鍵）：
- 滅菌完成後，必須將培養基放入 50°C 恆溫水浴槽，或自然冷卻至手觸摸瓶身溫熱不燙手（約 50°C）的程度。
- 在無菌操作台內，無菌加入上述經過過濾除菌的無菌 2 M 鎂離子溶液。
- ⚠️ 備註： 此時也是添加篩選用熱敏感抗生素（如 Ampicillin、Kanamycin）的黃金時機。若二價金屬鹽未等冷卻即加入，會與高溫培養基發生化學沉澱，破壞平板澄清度。
- 倒板與凝固： 充分搖勻後，小心倒入無菌 Petri 培養皿中（每片約 20–25 mL），靜置待其完全凝固。凝固後倒置存於 4°C 冰箱中防潮保存。
|
|
來電洽詢
 相關產品列表 |
 購物說明： |
|
|
|
|
|
|
