馬鈴薯葡萄糖肉湯培養基(Potato Dextrose Broth, PDB)規格說明書
🔬 一、 標準配方比例(每公升 / 1000 mL)
在國際化妝品規範(ISO 18415)、食品安全衛生檢驗(FDA BAM)與藥典微生物限度試驗中,市售標準脫水液態粉末每公升的標準秤重通常為 24.0 公克:
- 馬鈴薯浸出粉(Potato Infusion Powder): 4.0 g(等同於 200g 新鮮馬鈴薯之水溶性複合澱粉與無機鹽精華)
- 葡萄糖(Dextrose): 20.0 g(高濃度核心植物性碳源與能量來源)
- 最終 pH 值(25°C): 5.1 ± 0.2(或 5.6 ± 0.2,依各廠牌標準而定,天然偏微酸性)
🧫 二、 微生物培養的核心應用情境
PDB 是全球真菌學與工業微生物界用於酵母菌(Yeasts)與黴菌(Molds)液態懸浮培養的金本位標準肉湯:
- 菌絲體大量擴繁與生物量生產: 移除固化用的洋菜粉後,液態的馬鈴薯澱粉與高濃度葡萄糖能讓**真菌菌絲體(Mycelium)**進行全方位、高效率的懸浮式對數生長。常用於生技製藥、菇類液態製種(菇類栽培)的大規模液態發酵。
- 增菌與計數前處理(Enrichment): 廣泛應用於藥品、化妝品、食品與乳製品檢驗中。當檢體中的真菌數量過低時,先利用 PDB 進行無菌增菌(增殖培養),隨後再轉種至固體平板(PDA)進行菌落計數與定性分析。
🛠️ 三、 加強化學選擇性:酸化與抗生素添加法
PDB 內含極高糖分,在常規 pH 下容易伴隨環境雜菌(細菌)共同生長。為了確保真菌液態純培養,通常會採取以下修正操作:
- 無菌過濾酸化法(pH 3.5):
- 操作: 培養基高壓滅菌完並完全冷卻至室溫後,以無菌操作外加約 10 mL 的 10% 酒石酸(Tartaric Acid)溶液,將肉湯 pH 精準強制壓低至 3.5 ± 0.2。
- 機制: 極端的酸性微環境能全面阻斷、抑制細菌繁殖,只允許耐酸的真菌發育。
- 抗生素篩選法:
- 操作: 滅菌後,在無菌操作台內額外添加經無菌過濾的氯黴素(Chloramphenicol)或鏈黴素(Streptomycin),可在維持常規 pH 的狀況下精準阻斷雜菌干擾。
🧪 四、 標準實驗室製備步驟(Directions)
- 懸浮溶解: 秤取 24.0 公克 的預混 PDB 脫水粉末,完全懸浮於 1000 毫升的蒸餾水或去離子水中。
- 攪拌均勻: 使用磁力攪拌器徹底攪拌。由於 PDB 不含洋菜粉,通常不需要如同固體 PDA 般加熱煮沸即可完全溶解,但必須確保無任何粉末結塊顆粒。
- 高壓滅菌限制(關鍵): 分裝至試管或發酵瓶中,使用滅菌釜以 15 磅壓力(121°C)維持 15 分鐘。請勿超時滅菌。在高糖(20g/L)環境下,過度加熱會引發嚴重的**焦糖化(Caramelization)**與梅納反應,導致液體顏色變深發黑、析出沉澱,並產生具抑菌毒性的副產物。
- 外觀與保存: 滅菌完後應呈現**澄清、無沉澱、淡琥珀色(Clear, light amber)**的液態。使用後必須立刻將瓶蓋密封旋緊,存於 10–30°C 的乾燥避光處防止吸濕結塊。