LB 瓊脂培養基（LB Agar，全名 Lysogeny Broth / Luria-Bertani Agar）是微生物學與分子生物學實驗室中最經典、使用頻率最高的基礎固體培養基。 它專門用於培養、維持與篩選大腸桿菌（E. coli）及其重組質體株。
以下為您條列 LB Agar 的核心配方、調配步驟與應用指南：

🧫 一、 標準 LB Agar 配方（每公升 1000 mL）
在調配標準固體培養基時，通常包含以下固定比例（常稱為 Miller 配方）：

• 胰蛋白腖（Tryptone）： 10.0 公克（提供核心有機氮源與豐富的色胺酸）
• 酵母萃取物（Yeast Extract）： 5.0 公克（提供碳源、維生素 B 群與生長因子）
• 氯化鈉（NaCl）： 10.0 公克（維持培養基的滲透壓。若為特殊低鹽需求，Lennox 配方僅使用 5.0g）
• 洋菜粉（Agar）： 15.0 公克（固化劑，無營養價值）
• 蒸餾水（Distilled Water）： 加至 1000 毫升（最終 pH 值應調整至 7.0 ± 0.2）

---

🔬 二、 核心成分各司其職

• Tryptone（酶解酪蛋白）： 含有豐富的小分子多胜肽與游離胺基酸，讓大腸桿菌能極快速地吸收。
• Yeast Extract： 提供細菌快速分裂所需的輔酶與核苷酸前體。
• Agar（洋菜）： 賦予培養基固態表面，使細菌能在其上形成肉眼可見、可單獨挑取的單一菌落（Single Colonies）。

---

🧪 三、 實驗室製備 5 大步驟

1. 混合與溶解： 將 Tryptone、Yeast Extract、NaCl 與 Agar 秤量後放入二公升的血清瓶或三角瓶中，加入約 900 mL 蒸餾水，攪拌均勻後定容至 1000 mL。
2. 調整 pH 值： 使用 1N NaOH 溶液將 pH 值精準調至 7.0。
3. 高壓滅菌（Autoclave）： 旋緊瓶蓋（需稍微回旋半圈留出排氣縫隙），放入滅菌釜以 121°C、高壓滅菌 15 分鐘。
4. 倒板（Pouring Plates）： 滅菌完成後，讓培養基冷卻至約 50°C（手觸摸瓶身溫熱不燙手的程度）。此時若有需要，可在此階段加入抗生素。隨後在無菌操作台內，每片培養皿倒入約 20–25 mL 的固體洋菜。
5. 凝固與保存： 靜置凝固後，將培養皿倒置（底朝上，防止冷凝水滴落影響菌落），放入 4°C 冰箱中避光保存，通常可存放 2–4 週。

---

🧬 四、 核心應用範疇

• 基因選殖與質體篩選（Cloning & Selection）：
  • LB Agar 最常與抗生素（如 Ampicillin 氨苄青黴素、Kanamycin 卡那黴素）搭配使用。
  • 只有成功轉型（Transformation）並帶有抗藥性基因質體的大腸桿菌，才能在含有抗生素的 LB 瓊脂平板上生長，藉此篩選出陽性複製子。
• 藍白篩選（Blue-White Screening）：
  • 在 LB Agar 中額外添加 IPTG 與 X-Gal，可利用 β-加拉糖苷酶的顯色反應，直接透過菌落顏色（藍色或白色）辨識質體是否成功嵌入外源基因。

---