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| 質體中量萃取套組(滴管)-50R |
產品編號 : Bio-PD50
產品規格 : 50 R
廠 牌 : Biokit
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| 詳細資料 |
一、 產品基本資料
- 產品名稱:Plasmid Midiprep Kit, 50R
- 產品編號:Bio-PD50
- 產品規格:50 R
- 廠牌:Biokit
- 技術原理:鹼溶裂法結合陰離子交換層析技術 (Alkaline Lysis & Anion-Exchange Chromatography)
- 樣品大小:50 - 100 ml 細菌培養液
- 質體產量:可達到 250 µg
- 核酸結合力:每個中量純化管柱之最大核酸結合量多至 250 µg DNA
- 高純度指標:吸光度比值穩定維持於 1.8 - 2.0 (OD260/280)
- 操作時間:約 120 分鐘即可完成全流程
- 產品特點:
- 高純度低污染:獲得的高純度去氧核醣核酸不含核醣核酸的污染。
- 安全無毒:全套組試劑製程無有機化學藥品及危險化學藥品。
- 儲存條件:室溫(15-25°C)乾燥保存
二、 化學性質
- 專一性陰離子交換介質:層析管柱基質表面修飾具高密度正電荷的功能基團,在特定流體力學環境下,能與帶負電荷的質體 DNA 骨架產生極高親和力的靜電結合。
- 高效細胞裂解系統:利用鹼溶裂法迅速變性細菌染色體 DNA 與蛋白質,同時藉由高活性核醣核酸分解脢完整降解宿主 RNA。
- 高鹽選擇性洗脫化學:洗脫緩衝液具備高濃度反離子(高鹽緩衝液),能競爭性置換與層析基質結合的質體 DNA,將其高效率純化出來。
- 中性重懸與洗滌體系:清洗緩衝液能有選擇性地移除未結合的蛋白質、細胞代謝物與微量脂質,不干擾管柱內已結合的核酸結構。
三、 核心實驗應用情境
- 中量質體富集與克隆:專為 50-100 ml 細菌培養液設計,可在 120 分鐘內快速產出高達 250 µg 的高品質質體,滿足常規克隆與基因建構需求。
- 高規格核酸定序與放大反應:優異的吸光度比值(1.8-2.0)展現極高純度,不含任何有機化學藥品,可完美應用於自動化核酸定序,以及高靈敏度的聚合酶連鎖擴增反應。
- 限制酶切割與試管內轉錄:完全移除內源性核酸酶與細胞雜質,純化出的質體能被限制酶精確切割,並完美對接南方雜交法與試管內轉錄反應。
四、 實驗操作注意事項
- 菌體用量與裂解配比:請勿超過 100 ml 的細菌培養量。菌體量過大會造成鹼溶裂解不完全或黏稠度過高,導致基因體 DNA 污染,進而降低質體純度。
- 重力流速與管柱平衡:離子交換管柱在加樣前務必依說明書進行平衡。純化過程中需確保液體依重力自然流下,切勿強行加壓,以維持最佳的核酸結合與清洗效果。
- 酒精沉澱與洗滌要領:使用高鹽緩衝液洗脫後,需以異丙醇或乙醇進行酒精沉澱。沉澱後的 DNA 團塊務必以 70-75% 酒精小心清洗並完全風乾,確保無殘留鹽類與酒精干擾下游實驗。
- 質體重懸與完全溶解:沉澱風乾完畢後,請加入適量無核酸酶水或中性緩衝液,於室溫或 4°C 靜置使其完全溶解,避免因溶解不均影響定量與後續限制酶切割效率。
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來電洽詢
產品相關檔案 |
| 檔案名稱 |
檔案大小 |
上傳時間 |
下載 |
| Plasmid Midiprep Kit-滴管-P-midi.pdf |
21KB |
2011/10/27 上午 11:32:38 |
下載 |
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購物說明: |
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