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| 96孔Seq dye Remove-10R |
產品編號 : Bio-96DR10
產品規格 : 10 R
廠 牌 : Biokit |
| 詳細資料 |
一、 產品基本資料
- 產品名稱:96孔定序染料去除套組-10R (96-Well Seq Dye Removal Kit - 10R)
- 產品編號:Bio-96DR10
- 產品規格:10 x 96 次反應 / 套組
- 技術原理:膠體過濾微孔濾膜分離技術 (Gel Filtration / Size-Exclusion Membrane Technology)
- 主要用途:高通量移除定序反應後殘留的未結合螢光染料(Dye Terminators)與鹽類
- 回收對象:大於或等於 20 bases 之 Sanger 定序延伸產物與單股/雙股 DNA
- 操作時間:約 10 - 20 分鐘即可完成全流程
- 產品特點:
- 迅速高效:採用 96 孔盤高通量設計,無須繁瑣的酒精沉澱或重覆洗滌步驟。
- 安全綠色配方:全套組試劑製程無有機化學藥品及危險化學藥品(不含酚與氯仿)。
- 儲存條件:2 - 8°C 冷藏乾燥保存,切勿冷凍。
二、 化學性質
- 基質膠體物理特性:孔盤內嵌入具備均一微孔結構的凝膠層析介質,依據分子量大小(Size-Exclusion)原理進行高精度阻隔分離。
- 染料特異性螯合/阻留化學:凝膠基質能高效吸附並滯留未反應的游離型 BigDye 螢光終止子、微量 dNTPs、引物以及殘留鹽類。
- 化學成分穩定性:預裝填緩衝液背景值極低,在 2 - 8°C 條件下不發生介質崩解,能維持長效且穩定的純化親和力。
- 中性洗脫環境:洗脫體系採用超純無核酸酶水或低離子背景緩衝液,可迅速將純化後的 DNA 片段自濾膜析出。
三、 核心實驗應用情境
- 高通量 Sanger 定序前處理:專為 96 孔板格式設計,在毛細管電泳定序前,成批次快速清除未結合的游離染料,免除傳統酒精沉澱法的產物流失與不便。
- 消除螢光染料峰 (Dye Blobs):高效克服定序圖譜前段常見的「染料團」或偽峰干擾,確保分析軟體對起始鹼基調用(Base-calling)的精確度。
- 提升電泳讀長 (Read Length):純化後的定序反應產物不含干擾鹽類與雜質,有效提高 Phred 20 優質讀長(平均大於 700 bps)與平均訊號強度。
四、 實驗操作注意事項
- 微孔板轉子與水平配平:本套組採用 96 孔盤格式,離心時務必配備微孔板專用吊桶式轉子,並確保兩側板框配平精確,以防止因離心力不均導致各孔膠體流速不一。
- 膠體預離心與多餘水分移除:首次使用前,須按照標準轉速進行預離心以排除孔盤內過多的保存液(Staging buffer),隨後方可加入定序檢體,避免檢體被過度稀釋。
- 精確垂直加樣定位:將 20 至 50 µl 的定序延伸產物加入 96 孔純化板時,吸頭務必垂直對準孔洞中央,直接加在膠體表面上,切勿觸碰或破壞凝膠結構。
- 洗脫物直接上機相容性:洗脫出的高純度 DNA 序列產物可直接 load 入毛細管電泳儀(如 ABI Prism BigDye 系統)進行定序,若未立即上機,應將 96 孔板密封並於 4°C 保存。
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