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| pUC57 DNA |
產品編號 ： MSD17
產品規格 ： 50ug
廠 牌 ： BBI |
| 詳細資料 |
一、 產品基本資料
產品名稱：pUC57 質體去氧核糖核酸 (pUC57 Plasmid DNA)
標準濃度：0.5 mg/mL
產品包裝：500 µg / 1.0 mL / 支
產品外觀：澄清無色水性溶液
質體大小：雙股環狀結構，確切長度為 2,710 鹼基對 (bp)
溶劑系統：10 mM Tris-HCl 與 1 mM EDTA 緩衝液（pH 8.0）
儲存條件：4°C 短期儲存可維持 3 個月，長期保存務必置於 -20°C。
產品用途：本產品僅限科學研究與實驗室研發使用，不得用於臨床診斷、人體或動物之醫療與食品。
二、 化學與物理性質
化學組成：由大腸桿菌宿主菌中提取、經高度純化的超螺旋結構雙鏈環狀質體 DNA。
載體特性：屬於分子生物學中最常用且廣泛普及的基因選殖載體（Cloning Vector）之一，具备高拷貝數特性。
抗藥性標記：含有氨苄青黴素（Ampicillin）抗性基因，以及用於藍白篩選的 lacZ 基因片段。
核酸純度：經分光光度計檢測，A260/A280 吸光比值介於 1.8 至 2.0 之間，且超螺旋結構占比大於 90%。
酶活性殘留：經嚴格品質控管，無可偵測之脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶活性殘留。
三、 核心實驗應用情境
常規基因選殖載體：作為分子生物學研究的核心基礎載體，利用其優化的多克隆位點，可高效嵌入與擴增外源目標片段或人工合成基因。
限制酶切反應與圖譜鑑定：擁有多個常見的單一限制酶切位點，常用於測試限制酶切活性、鑑定選殖片段大小或建立酶切對照。
藍白篩選選殖驗證：載體內含 lacZ 基因片段，在外源片段成功插入多克隆位點破壞讀框後，可直接於含有 X-gal 和 IPTG 的培養基上進行重組子的視覺化篩選。
轉化陽性對照：在細菌轉化實驗中作為高純度的標準陽性對照質體，用以評估與校正感受態細胞的轉化效率。
四、 標準操作步驟
步驟一：試劑解凍與混勻
將產品自 -20°C 取出，置於冰浴中完全融化。完全解凍後，用手指輕彈管壁溫和混勻，並進行瞬間離心使液體集聚管底。本產品日常操作請避免劇烈震盪，以維持超螺旋結構之完整性。
步驟二：底物配製
依據實驗需求吸取適量 pUC57 DNA。於 50 µL 常規酶切反應體系中，通常建議加入 0.5 µg 到 1 µg 的質體 DNA（即吸取 1 µL 到 2 µL 本產品），隨後加入對應的限制酶緩衝液與酶液進行消化反應。
步驟三：電泳觀測
直接吸取未酶切的質體或酶切後的線性化產物，與上樣緩衝液混合後注入瓊脂糖凝膠孔中進行電泳。未酶切的質體通常會分層呈現超螺旋與開環兩條主要帶。
五、 核心操作注意事項
形態遷移特性辨識：未經任何限制酶切的天然 pUC57 質體在電泳時會呈現多條條帶，其中超螺旋結構的泳動速度明顯快於其實際的 2,710 bp 線性分子量。若要進行精準分子量比對，必須先使用單切點限制酶將其完全線性化。
防止外源核酸酶污染：質體 DNA 易受環境中微量脫氧核糖核酸酶污染而導致超螺旋結構斷裂、降解。操作全程務必配戴無粉手套、使用經認證無酶的耗材與帶濾芯的微量移液管尖，並於專用的超淨工作台內進行。
避免頻繁凍融：頻繁的溫度循環會引發質體結構由超螺旋向開環或線性化轉變，進而影響電泳圖譜。首次開封後，強烈建議依據實驗室日常消耗量，將其微量分裝成小體積存於 -20°C 凍存。
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來電洽詢
 產品相關檔案 |
| 檔案名稱 |
檔案大小 |
上傳時間 |
下載 |
| pUC57-MSD17.pdf-pUC57-MSD17.pdf |
254KB |
2015/6/3 上午 11:42:28 |
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 購物說明： |
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