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DAPI染色液(1mg/ml),2ml
產品編號 : BioDA01
產品規格 : 2ml
廠       牌 : Biokit

詳細資料
一、 產品基本資料
產品名稱:DAPI 螢光染色液 (DAPI Staining Solution)
標準濃度:1 mg/mL,屬於高濃縮 100X 儲存液,體積小、穩定性高且容易儲存。
包裝規格:2.0 mL / 支
產品外觀:澄清無色至微帶淡黃色之水性溶液
分子式:C16H15N5·2HCl
分子量:350.25
光學性質:游離狀態下最大激發波長為 340 nm,最大發射波長為 488 nm。與雙股 DNA 結合後,最大激發波長轉變為 364 nm,最大發射波長轉變為 454 nm,且發光亮度會大幅增強 20 倍。
儲存條件:-20°C 恆溫冷凍保存,必須嚴格避光。
運輸條件:維持全程低溫冰寶或乾冰避光運輸。
產品用途:本產品僅限科學研究與實驗室研發使用,不得用於臨床診斷、人體或動物之醫療與食品。

二、 化學與物理性質
化學組成:4′,6-Diamidino-2-phenylindole 二鹽酸鹽水溶液。
結合特異性:屬於高親和性的 DNA 結合染料,能特異性地嵌入雙鏈 DNA 的 A-T 鹼基對小溝中。
細胞通透性:DAPI 是一種可以穿透細胞膜的藍色螢光染料,具備對固定與活體細胞、組織的通透染色能力。
酶活性干擾:不含任何核酸酶。

三、 核心實驗應用情境
細胞核與 DNA 螢光對比染色:適用於細胞、組織的染色。為共軛焦顯微鏡、螢光顯微鏡觀測提供清晰的藍色細胞核定位圖像。
細胞凋亡檢測:透過觀察 DAPI 著色後的細胞核形態,辨識凋亡細胞特有的細胞核固縮、染色質凝聚或核碎裂現象。
流式細胞儀分析與細胞計數:可用於多色免疫螢光分析中的細胞核定位、DNA 含量分析、細胞週期檢測或流式細胞儀分選等多元實驗。

四、 標準配置與操作指南
本產品為 1 mg/mL 的高濃度儲存液,使用時必須稀釋成新鮮的工作液進行染色:
步驟一:配置工作液
使用磷酸鹽緩衝液或常規培養基,將本產品進行稀釋。一般推薦的最終新鮮工作液濃度為 0.5 µg/mL 到 10 µg/mL。
步驟二:染色反應
細胞或組織樣本經固定與通透處理並完成洗滌後,將 DAPI 工作液直接注入並覆蓋樣本孔槽或載玻片。每孔加入足量的工作液,於室溫下避光溫育 3 到 10 分鐘。
步驟三:洗滌與觀測
移去染色液,使用緩衝液洗滌樣本 2 到 3 次,以移除游離的染料並降低背景雜訊。隨後即可置於螢光顯微鏡或流式細胞儀下進行觀測。

五、 核心操作注意事項
活細胞染色濃度調校:若需應用於活細胞染色,由於活細胞膜的屏障效應,通常需要提高工作濃度(如 10 µg/mL)並適度延長溫育時間,但需注意高濃度可能引發的細胞毒性。
嚴格避光防淬滅:DAPI 對光極度敏感。不論是母液儲存、工作液配製還是染色後的樣本,全程操作與溫育均須使用鋁箔紙包裹或在暗室中進行,以防止螢光淬滅。
分裝保存防變性:2 mL 母液容量大,若頻繁取用與解凍會加速染料降解。首次開封後,強烈建議依據單次用量分裝至棕色避光微量離心管中,置於 -20°C 凍存。
安全防護與毒性防範:DAPI 為一種已知的潛在致突變物與核酸嵌入劑。操作時務必配戴無粉手套、護目鏡與實驗衣,避免與皮膚直接接觸或吸入。廢液必須依據實驗室有害生物化學廢棄物標準進行收集與處理。
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