一、 產品基本資料
產品名稱:6X 膠體電泳上樣緩衝液 (6X Loading Dye / 6X DNA Loading Buffer)
標準濃度:6X 濃縮儲存液
包裝規格:1.0 mL / 支
產品外觀:深藍色澄清液體
指示染料遷移特性:在常規 1% 瓊脂糖凝膠中,內含的溴酚藍(Bromophenol Blue)與二甲苯青(Xylene Cyanol FF)分別與約 400 bp 及 4,000 bp 的雙鏈 DNA 片段遷移速度同步。
儲存條件:4°C 短期儲存可維持 6 個月,長期保存務必置於 -20°C。
產品用途:本產品僅限科學研究與實驗室研發使用,不得用於臨床診斷、人體或動物之醫療與食品。
二、 化學與物理性質
化學組成:內含精準配比的溴酚藍、二甲苯青 FF、甘油以及 EDTA 緩衝系統。
沉降機制:含有高濃度的甘油(Glycerol),能顯著增加樣品的密度與黏稠度,確保 DNA 樣本在注膠時順利沉降至凝膠孔底,防止樣本在緩衝液中飄散。
螯合特性:含有高濃度的 EDTA,能有效螯合金屬離子,即時終止依賴鎂離子的去氧核糖核酸酶活性,保護 DNA 條帶不被降解。
酶活性干擾:經嚴格品質控管,試劑本身不含任何核酸酶污染。
三、 核心實驗應用情境
常規去氧核糖核酸膠體電泳:適用於瓊脂糖凝膠電泳(Agarose gel electrophoresis)與聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE),用作聚合酶鏈鎖反應擴增產物、質體或限制酶切片段上樣前的密度調配。
電泳進度動態指示:透過雙色染料在電泳時的遷移分層,肉眼即可直接判斷小分子量(400 bp 區間)與大分子量(4,000 bp 區間)核酸的實時跑膠位置,防止目標片段跑出膠外。
限制酶切反應終止:在完成酶切消化實驗後,直接加入本產品可利用內含的 EDTA 迅速螯合酶反應所需的二價金屬離子,達到終止消化反應並直接注膠之目的。
五、 核心操作注意事項
指示染料屏蔽效應防範:當目的 DNA 片段大小正好落在 400 bp 或 4,000 bp 附近時,高濃度的指示染料呈色可能會遮蔽微弱的目標 DNA 條帶。若遇到此情況,建議減少 Loading Dye 的添加量,或在電泳結束後使用高靈敏度核酸染料進行後染色以穿透染料背景。
螢光干擾限制:本產品內含的常規指示染料不具備核酸內染功能。若要在紫外光或藍光透射儀下觀察 DNA 條帶,膠體製備時仍需另外加入 Ethidium Bromide、GelRed 等螢光核酸染料,或在電泳後進行後染色。
防止外源核酸酶污染:吸取時務必配戴無粉手套,並使用乾淨無酶的移液管尖,避免將環境中的去氧核糖核酸酶引入管內,進而影響後續待測核酸樣本的完整性。