50bp DNA Marker
產品編號 : Bio-50
產品規格 : 500ul/ 支
廠 牌 : Biokit
詳細資料
一、 產品基本資料
產品名稱:50bp 去氧核糖核酸分子量標準品 (50bp DNA Marker / Ladder)
分子量範圍:50 – 500 鹼基對 (bp)
條帶組成:內含多條精準雙鏈去氧核糖核酸條帶,典型組成為 50、100、150、200、250、300、350、400、450、500 bp。
特殊參考帶:通常以 250 bp 或 500 bp 為加強帶,呈色強度為其餘條帶的 2 到 3 倍,便於快速辨識分子量位置。
產品外觀:澄清藍色溶液(即用型預混指示劑)
包裝規格:500 µL / 支(約可供 100 次上樣)
儲存條件:4°C 短期儲存可維持 3 個月,長期保存務必置於 -20°C。
產品用途:本產品僅限科學研究與實驗室研發使用,不得用於臨床診斷、人體或動物之醫療與食品。
二、 化學與物理性質
化學組成:由質體 DNA 經特定限制酶切或聚合酶鏈鎖反應純化產物精準混合而成,預先溶解於含有甘油、EDTA 及電泳指示染料的緩衝液中。
溶劑系統:即用型配方(Ready-to-Load),無需額外添加上樣緩衝液(Loading Buffer)即可直接加樣。
酶活性殘留:經嚴格品質控管,無可偵測之脫氧核糖核酸酶與蛋白酶活性,條帶不降解。
三、 核心實驗應用情境
小分子量核酸電泳大小比對:專為瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯醯胺凝膠電泳設計,用於精準測定小分子 PCR 擴增產物、限制酶切片段或引物二聚體的大小。
高濃度膠體分離對照:適用於 2.0% 到 3.0% 的高濃度瓊脂糖凝膠,能將 50 bp 至 500 bp 之間每相差 50 bp 的微小片段清晰分離。
轉基因與短片段篩選鑑定:在基因分型(Genotyping)、微衛星 DNA(SSR)分析或小分子核酸純化實驗中,作為穩定可靠的條帶參照。
四、 標準操作步驟
步驟一:試劑回溫與混勻
將產品自 -20°C 取出,於室溫下完全融化。
溫和微量震盪或輕彈管壁混勻,並進行瞬間離心使液體集聚管底。本產品嚴禁加熱或煮沸變性。
步驟二:加樣電泳
常規電泳每孔建議上樣量為 5 µL。
如果使用高靈敏度核酸染料(如 GelRed 等)進行膠內染色或後染色,可依據成像設備的靈敏度適度減少上樣量至 3 µL 兩側,以防條帶過載信號過強。
步驟三:影像擷取
電泳結束後,置於紫外線凝膠成像儀或藍光透射儀下進行觀測與拍照。
五、 核心操作注意事項
嚴禁高溫變性:本產品為高純度雙鏈 DNA 片段,上樣前絕對禁止進行 95°C 煮沸或熱變性處理,高溫會導致雙鏈解鏈,造成電泳條帶出現多重模糊影或異常條帶。
膠體濃度限制:本產品不適用於 1.0% 以下的低濃度瓊脂糖凝膠。在低濃度膠體中,50 bp 到 200 bp 的小片段會因遷移速度過快而擴散或直接跑出膠外。
防止外源核酸酶污染:吸取時務必配戴無粉手套,並使用乾淨無酶的移液管尖,避免環境中的脫氧核糖核酸酶進入管內引發 DNA 降解。
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2011/10/27 下午 12:10:49
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