甲苯胺藍 (Toluidine Blue) 是一種屬於醌亞胺(Quinone-imine)類的鹼性陽離子染料,主要透過陽離子與細胞或組織中的酸性基團(如核酸、酸性黏多醣)結合而顯色。
物理與化學性質
化學結構與呈色機制:商品多為氯化鋅複鹽C15H16ClN3S·0.5ZnCl2=373.97, 分子量約 373.97。 級別:BS 含量:≥84.0% 分子包含胺基與醌型苯環兩個發色團,以及兩個助色團,可促進電離成鹽並增強對組織的結合力。
外觀與溶解性:呈深綠色或黑灰色粉末,具古銅色金屬光澤,易溶於水(水溶液呈深藍色)。
異染性(Metachromasia):
正染:結合一般細胞核或 DNA/RNA 時呈單體狀態,顯現 藍色。
異染:遇到肝素、組織胺或硫酸軟骨素等高密度帶負電荷的酸性物質時,染料分子聚合成多聚體,轉而呈現鮮艷的 紫紅色。
生物醫學主要用途
肥大細胞(Mast Cells)特異性染色:利用異染性將肥大細胞胞質內的肝素與組織胺顆粒染成紫紅色,用於過敏、免疫及發炎反應研究。
組織學與神經病理學:
神經元染色:專一性染色神經元內的尼氏體(Nissl bodies,富含 RNA)。
軟骨顯影:將軟骨基質中的硫酸軟骨素染成異染紫紅色。
半薄切片定位:用於電子顯微鏡(TEM)前處理之環氧樹脂包埋半薄切片(0.5-1 um )的光學顯微鏡觀察。
臨床口腔癌與黏膜病變篩檢:利用增殖活躍的異型增生細胞與癌細胞含有較多核酸且細胞間隙較大的特性,進行局部塗抹著色,輔助早期病變診斷與手術邊緣定位。
使用情境限制與注意事項
臨床篩檢之限制(假陽性與假陰性):
創傷、潰瘍或良性發炎性病變會因細胞密度與核酸暴露增加而呈現假陽性染藍反應。
僅能作為預備篩檢工具,不能取代病理組織切片檢查(Biopsy)。
pH 值敏感性:
異染性顯色高度依賴溶液 pH 值。用於肥大細胞與軟骨染色時,通常需維持在 酸性環境(pH 2.0–2.5),以抑制其他弱酸性基團的非特異性背景染色。
毒性與安全防護:
商業品常含氯化鋅成分,對皮膚、眼睛與呼吸道具刺激性。操作粉末時應於通風處進行並配戴防護裝備,廢液需妥善收集處理。